(Kao pouzdani dobavljač, HANGZHOU JECI BIOCHEM nudi stabilnu-proizvodnju, visoko-kvalitetni NAD (nikotinamid adenin dinukleotid, CAS 53‑84‑9), pružajući pouzdanu podršku sirovinama za IVD i aplikacije za metaboličke analize. Naš dosljedan rezultat i stroga kontrola kvaliteta čine nas poželjnim partnerom za snabdijevanje NAD dijagnostičkom{6}}klasom.)
NAD (nikotinamid adenin dinukleotid) je važan koenzim prirodno prisutan u ćelijama, koji postoji u dva oblika: oksidovanom obliku (NAD⁺) i redukovanom obliku (NADH). Može se interkonvertirati putem redoks reakcija, regulirajući različite biološke procese kao što su metabolizam ćelijske energije i prijenos signala. NAD sudjeluje u ključnim enzimskim reakcijama za hvatanje promjena metabolita, a abnormalnosti u razinama NAD i NADH i njihovim omjerima usko su povezani s pojavom i razvojem mnogih bolesti. Stoga je postao važan marker za kliničko biohemijsko testiranje i rano otkrivanje bolesti. NAD proizvodi visoke -čistoće i visoke-stabilnosti-razreda za dijagnostiku, kao osnovne sirovine za in vitro dijagnostičke reagense (IVD) i komplete za metaboličko testiranje, igraju ključnu ulogu u poboljšanju osjetljivosti detekcije i pouzdanosti rezultata.
Istorija razvoja dijagnostičkog-razreda NAD
Godine 1906, Arthur Harden je otkrio "misteriozni faktor koenzima" koji podstiče metabolizam tokom njegovog proučavanja alkoholne fermentacije kvasca (kasnije je dokazano da je NAD).
Godine 1929. Hans von Euler{1}}Chelpin je identifikovao dinukleotidnu strukturu NAD.
Godine 1930. Otto Warburg je razjasnio redoks mehanizam između NAD i NADH, pojašnjavajući da NADH pokazuje karakterističnu ultraljubičastu apsorpciju na 340 nm dok NAD nema apsorpciju na ovoj talasnoj dužini, postavljajući teoretsku osnovu za enzimske testove.
Godine 1948. Horecker et al. je potvrdio molarni koeficijent ekstinkcije NADH na 340 nm, omogućavajući direktnu kvantifikaciju brzina enzimske reakcije kroz promjene apsorbancije [1].
Godine 1961. Oliver H. Lowry je uspostavio NAD(P)/H cikličnu metodu, pionirsku kvantitativnu analizu tkiva/ćelijskog NAD(P)/H.
Od 1962. do 1963. Boehringer Mannheim (kasnije ga je kupio Roche) lansirao je komplet reagensa zasnovan na detekciji apsorbancije NADH 340 nm za laktat dehidrogenazu (LDH), postižući prvu komercijalnu primjenu NAD dijagnostičkog- kvaliteta kao sirovine koenzima.
Godine 1973. Bernofsky et al. uspostavio princip ADH-PES-MTT sistema za pojačavanje (ADH-PES-MTT kolorimetrijski sistem) [2];同年, Kato et al. (Lowry Laboratory) je razvio ADH-MDH dual-enzimsku metodu ciklusa, omogućavajući visoko osjetljivu detekciju NAD/NADH [3].
Od tada, NAD dijagnostičke{0}}razrede postao je osnovna sirovina za rutinsko biohemijsko testiranje i kontinuirano se širio na najsavremenija-oblasti kao što su istraživanje biomarkera neurodegenerativnih bolesti, praćenje metabolizma tumora i procjena starenja.
Dijagnostički scenariji NAD aplikacije - razreda
Osnovne sirovine za kliničku biohemijsku dijagnozu
① Detekcija laktat dehidrogenaze (LDH).
Princip detekcije:
Laktat+NAD+⟶LDHPiruvat+NADH+H+
Scenariji aplikacija: Odjel za kardiologiju (dijagnostika akutnog infarkta miokarda), Klinička laboratorija (dijagnostika hemolitičke anemije), Hepatologija (procjena oštećenja ćelija jetre) itd.
Normalni opseg LDH: 140 - 280 U/L (odrasli, postoje razlike među metodama)
Klinički značaj: > 280 U/L (ukazuje na oštećenje tkiva (jetra, srce, bubrezi, mišići, pluća, itd.)), > 500 U/L (često se viđa kod infarkta miokarda, hemolitičke anemije, malignih tumora, teških infekcija).
② Detekcija malat dehidrogenaze (MDH).
Princip detekcije:
Jabučna kiselina+NAD+⟶MDHoksalooctena kiselina+NADH+H+
Scenariji aplikacija: klinički reagensi (dijagnoza mitohondrijalnih bolesti), polje naučnog istraživanja (istraživanje mitohondrijske funkcije), itd.
Normalni opseg MDH: 12.5 - 50 U/L (različite laboratorije imaju male razlike zbog metoda detekcije i reagensa)
Klinički značaj: Povišenje ukazuje na povredu mitohondrija, nekrozu tkiva, itd.
③ Detekcija izocitrat dehidrogenaze (ICDH).
Princip detekcije:
Izocitrična kiselina+NAD+⟶ICDH -Ketoglutarna kiselina+NADH+H+
Scenariji aplikacija: Klinička dijagnoza mitohondrijske bolesti, polje naučnog istraživanja (procjena oštećenja jetre, istraživanje energetskog metabolizma) itd.
Normalni opseg ICDH: 1 - 5 U/L (serum)
Klinički značaj: Povišenje ukazuje na povredu mitohondrija, povredu hepatocita, nekrozu tkiva itd.
④Detekcija kreatin kinaze (CK).
Princip detekcije:
Fosfokreatin+ADPGlukoza+ATPG-6-P+NAD+⟶CKKreatin+ATP⟶HKG-6-P+ADP⟶G6PDH6PG+NADH
Scenariji primjene: Odjel za kardiologiju (akutni infarkt miokarda, miokarditis), Ortopediju/Urgentni odjel (povrede mišića, rabdomioliza), Neurologiju (miopatija) itd.
Normalni opseg CK: mužjaci 38 - 174 U/L; Ženke 26 - 140 U/L (razlike među metodama)
Klinički značaj: Povišeni nivoi ukazuju na ozljedu miokarda ili skeletnih mišića, koja se obično viđa kod infarkta miokarda, miokarditisa, rabdomiolize, napornog vježbanja itd.
⑤ Detekcija glukoze
Princip detekcije:
Glukoza+ATPG-6-P+NAD+⟶HKG-6-P+ADP⟶G6PDH6PG+NADH
Scenariji primjene: Endokrinologija (dijagnoza dijabetesa i praćenje glukoze u krvi), Hitna pomoć (hipoglikemijska koma, hitna hiperglikemijska dijagnoza), Intenzivna medicina (monitoring glukoze u krvi pacijenata na intenzivnoj nezi) itd.
Normalni opseg glukoze: natašte 3.9 - 6.1 mmol/L; 2 sata nakon obroka < 7,8 mmol/L
Klinički značaj: Povišeni nivoi se vide kod dijabetesa, stresne hiperglikemije; Smanjeni nivoi se vide kod hipoglikemije, insulinoma, teškog oboljenja jetre itd.
⑥ Detekcija laktata
Princip detekcije:
Laktat+NAD+⟶LDHPiruvat+NADH+H+
Scenariji primjene: Hitna pomoć (procjena hipoksije šoka/tkiva), ICU (procjena nakon - spašavanja kritičnih pacijenata), Odjel za kardiologiju (srčana insuficijencija), Infektivne bolesti (sepsa), Sportska medicina (procjena fizičkog kapaciteta sportista), itd.
Normalni opseg laktata: 0.5 - 2.2 mmol/L (venska krv)
以下是图片内容的英文翻译,严格保持原格式:
⑦ Detekcija galaktoze
Princip detekcije:
{{0}D-Galaktoza+NAD+⟶GalDHGalaktonska kiselina+NADH+H+
Scenariji aplikacija: Neonatalni skrining (dijagnostika galaktozemije), pedijatrija (urođene greške metabolizma), gastroenterologija (identifikacija netolerancije na laktozu), hepatologija (procjena funkcije jetre), itd.
Normalni opseg galaktoze: Serum natašte: < 0,28 mmol/L; Novorođenčad: < 1,11 mmol/L
Klinički značaj: Povišeni nivoi se vide kod galaktozemije, insuficijencije jetre, kongenitalnog nedostatka metaboličkog enzima galaktoze, itd.
⑧ Detekcija etanola
Princip detekcije:
Etanol+NAD+⟶ADHAcetaldehid+NADH+H+
Scenariji aplikacija: Hitna pomoć (Dijagnostika akutnog trovanja alkoholom), Centar za fizikalni pregled (Alkotest kod vozača), Forenzička identifikacija (Mjerenje koncentracije alkohola u krvi) itd.
Normalni opseg etanola: 0 mmol/L (koji ne-piju)
Klinički značaj: Povišeni nivoi ukazuju na konzumaciju alkohola ili trovanje alkoholom; previsoke koncentracije mogu dovesti do depresije centralnog nervnog sistema, respiratorne i cirkulatorne inhibicije.
⑨ -Detekcija hidroksibutirata
Princip detekcije:
-Hidroksimaslačna kiselina+NAD+⟶ -HBDHAcetosirćetna kiselina+NADH+H+
Scenariji aplikacija: Endokrinologija (dijagnoza dijabetičke ketoacidoze), ishrana (praćenje unosa ishranom) itd.
Normalni opseg -hidroksibutirata: Krv natašte: < 0,27 mmol/L (razlike među metodama)
Klinički značaj: Povišeni nivoi ukazuju na dijabetičku ketoacidozu, gladovanje, dugotrajno-postovanje, alkoholnu ketoacidozu itd.
以下是图片内容的英文翻译,严格保持原格式:
⑨ -Detekcija hidroksimaslačne kiseline
Princip detekcije:
-Hidroksimaslačna kiselina+NAD+⟶ -HBDHAcetosirćetna kiselina+NADH+H+
Scenariji aplikacija: Endokrinologija (dijagnoza dijabetičke ketoacidoze), ishrana (praćenje ishrane) itd.
Normalni opseg -Hidroksimaslačne kiseline: Krv natašte: < 0,27 mmol/L (razlike među metodama)
Klinički značaj: Povišeni nivoi ukazuju na dijabetičku ketoacidozu, gladovanje, dugotrajno-postovanje, alkoholnu ketozu itd.
Biomarkeri za procjenu bolesti
NAD, kao biomarker za procjenu bolesti, trenutno je u fazi kliničkog prevođenja. Godine 2022. NADMED-ov Q-NADMED komplet za detekciju NAD⁺/NADH krvi postao je prvi proizvod za otkrivanje NAD na svijetu koji je dobio CE-IVD certifikat (Direktiva o in vitro dijagnostičkim medicinskim uređajima). On detektuje koncentracije NAD⁺ i NADH u ljudskoj punoj krvi, sa granicama detekcije NAD⁺: 330 nM; NADH: 119 nM. Koncentracija NAD⁺ u punoj krvi zdravih odraslih osoba je približno 18 μM (raspon: 15-23 μM) [4], koristi se za kvantitativno otkrivanje pune krvi i praćenje terapeutskih efekata prekursora NAD. Međutim, još uvijek nije odobren kao neovisni dijagnostički kriterij bolesti.
U području naučnih istraživanja, potencijalna vrijednost odnosa NAD/NADH u likvoru ili krvi kod neurodegenerativnih bolesti (npr. Alchajmerova bolest, Parkinsonova bolest), metabolizam tumora i procjena starenja se duboko proučava [5−8], ali se trenutno uglavnom primjenjuje u kliničkim ispitivanjima i istraživačkim istraživanjima, a ne u rutinskoj dijagnostici.
>Tržišni pejzaž dijagnostičkog-razreda NAD<
Trenutno je globalno tržište NAD-a-razreda za dijagnostiku u fazi brzog razvoja vođenog tehnologijom i rastom potražnje. Industrija ubrzano prelazi sa-dominacije uvoza na domaću supstituciju. In vitro dijagnostičko polje pokazuje strukturnu diferencijaciju: iako se ukupan broj kompleta reagensa smanjio, vodeća preduzeća (npr. Roche Diagnostics, Mindray Medical) ostaju stabilna i šire se u nove projekte kao što su metaboličko testiranje i procjena starenja, dok mala i srednja-poduzeća smanjuju proizvodne linije zbog pritiska na profit.
Glavni dobavljači NAD dijagnostičkog-razreda uključuju: Roche, Oriental Yeast, SunClone Bio, Shenzhen Bangtai, itd.
Reference
[1] HORECKER BL, KORNBERG A. Koeficijenti ekstinkcije reduciranog pojasa piridin nukleotida[J]. J Biol Chem, 1948, 175(1): 385 - 90.
[2] BENFORSKY C, SWAN M. Poboljšani ciklični test za nikotinamid adenin dinukleotid[J]. Anal Biochem, 1973, 53(2): 452 - 8.
[3] KATO T, BERNTSEN O, CARTER S, et al. Metoda enzimskog ciklusa za nikotinamid - adenin dinukleotid sa jabučnim i alkoholnim dehidrogenazama[J]. Anal Biochem, 1973, 56(2): 392 - 8.
[4] NATALIA V Balshova, Lev G Zavileysky, Artem V Artukhov, et al. Efikasan test i značaj markera NAD⁺ u ljudskoj krvi[J]. Front Med, 2022, 9, 886645.
[5] LAN Z P. Novi sistem za detekciju biomarkera i njegova primena u Kini [patent]. Kina, 119560018A[P]. 2024 - 11 - 12.
[6] YAN L, SUN MR, WU J, et al. Vrsta fluorescentne sonde za detekciju pirimidinskih nukleozida i metoda njihove pripreme i primjene: Kina, 117887460A[P]. 2025 - 09 - 02.
[7] JIN LP, ZHAO X, LU Y, et al. Hromogeno određivanje nikotinamid adenin dinukleotida i njegovih metabolita korištenjem piridin nukleozida kao kofaktora i njegova primjena u dijagnozi ili liječenju fermentativnih tekućina[J]. Kina, 112694070A[P]. 2023 - 12 - 22.
[8] HONG J, HAN ZW, NING XQ, et al. Primjena NAD⁺ kao molekularnog markera za prilagođeni razvoj proizvoda za dijagnosticiranje nelagode ženskih genitalnih organa[J]. Kina, 118109777A[P]. 2024 - 05 - 10.
